Nová technika používaná k diagnostice Downova syndromu
FISH znamená fluorescenční in situ hybridizaci. Test FISH nebo analýza FISH, jak se někdy nazývá, je relativně nová cytogenetická technika, která umožňuje cytogenetikovi určit, kolik kopií konkrétního chromozomu je přítomno, aniž by museli projít všemi kroky, které se podílejí na produkci karyotypu . Například analýza FISH vám může rychle říci, kolik chromozómů je číslo 21, ale nemůže vám říct nic o struktuře těchto chromozomů.
Jak to funguje
Testování FISH se obvykle provádí na stejných vzorcích jako karyotyp - krev, amniocyty nebo vzorka choriových vil. Test FISH se provádí za použití fluorescenční sondy, která se váže na určité specifické chromozomy. Tyto fluorescenční sondy jsou vyrobeny z DNA specifické pro určité chromozomy a jsou označeny fluorescenčním barvivem. Buňky použité v analýze FISH nemusí být pěstovány ani kultivovány (což může trvat 7 až 10 dní), takže výsledky analýzy FISH jsou mnohem rychlejší než výsledky karyotypu.
Typicky se odebere vzorek a odešle se do laboratoře a chromozomy se izolují na snímku. Sondy se pak umístí na snímek a nechávají se hybridizovat (nebo najít jejich zápas) asi 12 hodin. Protože sondy jsou vyrobeny z DNA, budou se vázat na "shodnou" DNA svého specifického chromozomu. Například sonda vyrobená z DNA specifické pro chromozom 21 se bude vázat na jakýkoliv chromozom číslo 21, který je přítomen.
Po hybridizaci (nebo lepení) se sklíčko vyšetří pod speciálním mikroskopem, který vidí fluorescenční obrazy. Počítáním počtu fluorescenčních signálů může cytogenetik určit, kolik specifických chromozomů je přítomno. Například osoba bez Downova syndromu bude mít dva fluorescenční signály odpovídající jejich dvěma chromosomům číslo 21 .
Osoba s trisomií 21 bude mít tři fluorescenční signály odpovídající jejich třem chromozomům s číslem 21. Typicky cytogenetičtí používají sondy pro 13, 18, 21, X a Y chromozómy. To jsou chromozomy, které mohou vést k trisomii pro lidi.
Diagnostika Downova syndromu
Přestože se nezobrazuje skutečná struktura analyzovaných chromozomů, analýza FISH vám může ukázat, kolik kopií konkrétního chromozomu je přítomno. V případě Downova syndromu používá cytogenetik sondy pro chromozom číslo 21. Pokud jsou pod mikroskopem vidět tři fluorescenční signály, provede se diagnóza Downova syndromu.
Jak se testování FISH liší od karyotypu?
Analýza FISH vám říká, že určité chromozomy jsou přítomny a kolik z nich je přítomno. Například typická analýza FISH vám řekne, kolik 13, 18, 21, X a Y chromozomů je přítomno v vzorku plodové vody. Analýza FISH neposkytuje informace o každém chromozomu, ani vám neposkytne informace o skutečné struktuře chromozomů.
Výhody
Hlavní výhodou analýzy FISH je, že může rychle poskytnout informace o určitých chromozomech. Například ve třech až čtyřech dnech může zjistit, kolik kopií chromozómu číslo 21 může mít určitá osoba.
Naproti tomu tradiční karyotyp může trvat až dva týdny.
Nevýhody
Hlavní nevýhodou analýzy FISH ve srovnání s karyotypizací je skutečnost, že analýza FISH vám poskytuje méně informací o všech studovaných chromozomech. Například typický prenatální test FISH vám řekne, kolik chromozomů 13, 18, 21, X a Y jsou přítomné (tj. Zda existují dvě kopie nebo tři), ale nedají vám žádné informace o žádném z ostatních chromozomů nebo jakékoli informace o skutečné struktuře chromozomů.
Co se zeptat svého lékaře
- Používá laboratoř testování FISH?
- Má moje pojistné krytí nákladů na testování FISH?
- Jak spolehlivá je testování FISH na Downův syndrom?
- Jak dlouho bude trvat, než dostanu výsledky FISH (z mé amnio nebo CVS)?
- Má laboratoř také plný karyotyp?
- Jak dlouho trvá, než získáte výsledky karyotypu?
Spodní linie
Analýza FISH má výhodu v poskytování rychlých, ale omezených informací o chromozómech plodu. Je velmi dobré odpovědět na otázku - "Má moje dítě má trizomii 21?", Ale poskytuje omezené informace o dalších strukturálních chromozomálních abnormalitách, jako jsou translokace a vymazání.
Zdroje
American College of Obstetricians and Gynecologists (ACOG). Screening fetálních chromozomálních abnormalit. Pracovní bulletin ACOG, číslo 77, leden 2007.
Národní institut výzkumu lidského genomu. Fluorescenční in situ hybridizace (FISH), 2008.